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D N A合成仪的原理

合成过程
第一个碱基的3‘末端固定在树脂上,下一个碱基的5’—OH用二对甲氧三苯甲基DMT保护,碱基上的氨基用苯甲酸保护,然后对3‘—OH用氨基磷酸化合物进行活化。
1.1个碱基的5’—OH和下个碱基的3‘—OH形成亚磷酸三酯,
2.然后用碘氧化成磷酸三酯
3.加入二氯乙酸除去第二个碱基5’—OH上的保护剂DMT
循环进行加入下一个碱基
合成完毕后
1.用苯硫酚除去5’-OH上的保护剂DMT
2.用浓氢氧化铵将片段与固体树脂断开,洗脱
3.用浓氢氧化铵在加热的条件下除去碱基上的保护剂
4.除去氢氧化铵,真空抽干
5.液相色谱或者PAGE,回收片段最长的。

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